文档类型
文章
出版日期
12-1-2018
发表在
膜
文摘
我们报告的优化detergent-mediated不可或缺的膜结合蛋白的结合,完整的流感病毒M2蛋白,通过直接插入detergent-saturated脂质体。Detergent-mediated重构是一个重要的方法,为研究膜蛋白,准备proteoliposomes,必须为每个组合优化的蛋白质和膜成分使用。调整的目的是准备样品为定点spin-labeling电子顺磁共振(SDSL-EPR)研究。我们的目标优化协议减少洗涤剂的用量,降低整体proteoliposome准备时间,并确认删除所有的洗涤剂。脂质体是由(1-palmitoyl-2-oleyl-sn-glycero-phosphocholine (POPC)和1-palmitoyl-2-oleyl-sn-glycero-3 - [phospho-rac - (1-glycerol)] (POPG)和洗涤剂octylglucoside (OG)是用于调整。严格的物理特性应用于优化调整过程的每一步。我们用动态光散射(DLS)来确定所需的噩饱和的脂质体。与Bio-Beads吸收在洗涤剂去除,我们量化洗涤剂浓度的比色测定,从而确定Bio-Bead添加的数量需要删除所有从最后proteoliposomes洗涤剂。我们发现隔夜Bio-Bead孵化中使用以前公布的协议可以省略,减少所需的时间调整。我们也监控与DLS proteoliposomes的大小分布,确认大小分布仍是整个重建过程基本恒定。
关键字
detergent-mediated调整,整合膜蛋白,流感病毒M2蛋白质,proteoliposomes, octylglucoside洗涤剂、动态光散射,比色测定
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建议引用
凯瑟琳Hirshfeld克劳奇et al。(2018)。“优化Detergent-Mediated流感病毒M2蛋白的结合成Proteoliposomes”。膜。卷8,问题4。DOI: 10.3390 / membranes8040103
https://works.最佳线上娱乐swarthmore.edu/fac-physics/353
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